752分光光度計是用于測量樣品在紫外可見光區(qū)吸光度的常用儀器。有效使用該設備,核心在于通過規(guī)范化的操作流程,獲得準確、可重復的測量數(shù)據(jù),為定量分析、純度檢查或反應監(jiān)測提供可靠依據(jù)。操作涵蓋儀器準備、參數(shù)設置、測量執(zhí)行、數(shù)據(jù)處理及維護等環(huán)節(jié)。 一、測量前的準備與儀器檢查
測量前需進行充分的準備工作。將儀器置于平穩(wěn)、無振動、無強光直射的工作臺。連接電源,但暫不開啟。檢查樣品室是否清潔,取出比色皿架。準備所需比色皿,確保其透光面潔凈、無劃痕、無水漬。用待測溶液潤洗比色皿。配制參比溶液與待測樣品溶液,必要時進行過濾以去除懸浮物。開啟儀器電源開關,預熱規(guī)定時間,使光源與檢測系統(tǒng)達到穩(wěn)定狀態(tài)。預熱期間,可進行后續(xù)的波長設置。
二、波長選擇與儀器調(diào)零
旋轉(zhuǎn)波長選擇旋鈕,將波長設置至分析方法指定的數(shù)值,并觀察波長顯示窗確認。打開樣品室蓋。將裝有參比溶液的比色皿放入樣品架靠內(nèi)側(cè)的參比池位置,將裝有待測溶液的比色皿放入另一位置。確保比色皿透光面朝向光路方向。關閉樣品室蓋。拉動樣品架拉桿,使參比池置于光路中。調(diào)節(jié)旋鈕,使數(shù)字顯示器顯示透射比為“100.0”或吸光度為“0.000”。此步驟用于校正基線,需在每次改變波長后執(zhí)行。
三、樣品測量與數(shù)據(jù)讀取
調(diào)零完成后,推動樣品架拉桿,使待測樣品池進入光路。此時,顯示器顯示的數(shù)值即為該樣品在設定波長下的吸光度或透射比值。等待讀數(shù)穩(wěn)定后記錄。若需測量多個樣品,依次將不同樣品比色皿推入光路,讀取并記錄各數(shù)值。每次更換樣品,都需確保比色皿外壁潔凈,必要時可用擦鏡紙擦拭。測量過程中,應避免頻繁開關樣品室蓋,以減少環(huán)境光影響。對于未知樣品,建議進行光譜掃描,確定其較大吸收波長。
四、數(shù)據(jù)處理與記錄規(guī)范
測量完成后,及時、準確地記錄數(shù)據(jù)。記錄內(nèi)容應包括:測量波長、使用的參比溶液、樣品名稱或編號、吸光度或透射比值、測量日期、操作者等信息。對于定量分析,需使用系列標準溶液在相同條件下繪制標準工作曲線,并將樣品測量值代入計算濃度。確保數(shù)據(jù)處理方法正確,計算結(jié)果無誤。原始數(shù)據(jù)與處理過程應清晰、完整地保存。
五、測量后操作與維護
測量結(jié)束后,取出所有比色皿。將溶液倒入指定廢液容器。立即用純水或適當溶劑清洗比色皿,清洗后倒置晾干。檢查樣品室內(nèi)有無溶液灑落,并用軟布或濾紙擦拭干凈。關閉儀器電源開關,拔下電源插頭。蓋上防塵罩。定期清潔儀器外表面與樣品室。長期不用時,應定期通電。
六、注意事項與常見問題
比色皿透光面禁止用手直接觸摸。注入溶液量應適宜,避免過滿溢出污染樣品室。比色皿放入樣品架時方向應保持一致。若樣品吸光度過高,超出儀器線性范圍,應稀釋后重新測量。確保參比溶液能有效扣除背景干擾。儀器搬動或維修后,建議檢查波長準確性。
有效使用752分光光度計,關鍵在于嚴謹、規(guī)范的操作習慣。從預熱、調(diào)零、測量到清潔,每一步都需認真執(zhí)行。清晰的理解測量原理、嚴格遵守操作規(guī)程、細致的數(shù)據(jù)管理,是獲得高質(zhì)量測量結(jié)果的根本保障。任何操作環(huán)節(jié)的疏漏都可能導致測量誤差,影響分析結(jié)論的可靠性。